世界杯(中国) 【佳学基因检测】多发性内分泌肿瘤1型的发病原因及基因检测

基因检测导读

多发性内分泌肿瘤1型 (MEN1) 是一种荒僻的常染色体显性遗传肿瘤轮廓征，其抓续受到内分泌学、胃肠病学、外科、辐射学、遗传学和分子生物学巨匠的泛泛饶恕。畴昔 20 年中已发表了两篇紧迫的临床本质带领论文，最近一篇发表于 8 年前。而后，文件中出现了一些对于 MEN1 基本生物学和临床特征的新主意，本文将经营这些数据。MEN1 编码卵白 menin 与升沉滋长因子 β/骨形态发生卵白、一些核受体、Wnt/β-catenin 和 Hedgehog 介导的细胞信号通路中的转录因子和染色质修饰卵白之间的遗传和分子相互作用，以及在小鼠模子上的临床前推敲，促进了对 MEN1 相干肿瘤发病机制和潜在药物侵扰的解析。基因会诊的越过为识别生殖系MEN1突变阴性患者的MEN1相干疾病提供了契机。对于儿童、青少年和妊娠期患者临床发扬的常识正在飞速积存，这些常识不错升沉为对这些极其脆弱患者的贬责。对于平静性神经内分泌肿瘤基因和分子特征的发现，以及会诊器具和手术步调的越过，复旧开展新式靶向疗法的临床考验。终末，对受MEN1及相干疾病影响的患者进行生活质料推敲，代表着对该问题进行药物经济学解读的必要起劲。鉴于推敲在泛泛界限和重心界限齐取得了进展，这篇实时的综述将这些推敲汇总并经营。

《多发性内分泌肿瘤1型的发病原因及基因检测》关键词：

MEN1、表型模拟、menin、突变阴性、神经内分泌肿瘤、表不雅遗传学、小鼠模子、药物颐养、手术步调、生活质料

图形撮要

图形撮要

要点

发现的受menin调控的通路为多发性内分泌肿瘤1型（MEN1）的新式颐养侵扰开辟了新的契机

MEN1 基因会诊使得针对基因阳性和阴性患者进行区别颐养成为可能。

明锐界限，举例青少年和孕珠时代的 MEN1 临床流程，不错通过青睐积存的训戒进行临床贬责

MEN1 相干胰腺神经内分泌肿瘤的发病机制过甚对患者贬责的影响得到了更潜入的了解

手术和药物颐养为 MEN1 的临床颐养带来了更光明的出息

多发性内分泌肿瘤 1 型 (MEN1) 或 Wermer 轮廓征 (OMIM *131100) 是一种荒僻的（患病率为 3-20/100 000）高渗入性的常染色体显性遗传病，由肿瘤阻难基因MEN1 的种系突变引起，该基因编码 610 个氨基酸的卵白质 menin 。患者被会诊患有 MEN1 对其家庭成员具有紧迫意旨，因为一级支属患该轮廓征的风险为 50%，况且不错通过MEN1突变分析识别出来。尽管行为一种常染色体显性遗传病，MEN1 不会出现性别二态性，但有报说念称女性患病率较高，但这些收尾的含义可能需要进一步考证。MEN1 系数临床特征的年齿相干渗入率在 20 岁时高出 50%，在 40 岁时高出 95%。此外，也有报说念称，由于首创东说念主效应而出现地舆齐集的情况。

MEN1 的特征是 20 多种内分泌和非内分泌肿瘤的不同组合，这些肿瘤在 11q13（MEN1基因处所位点）上发生杂合性缺失 (LOH)，导致MEN1双等位基因缺失（图 1）。内分泌肿瘤的发扬样式可能是激素分泌多余或肿瘤自己滋长。临床上，若同期出现以下两种或两种以上的典型内分泌疾病，则可怀疑该病：甲状旁腺增生导致的原发性甲状旁腺功能亢进症 (PHPT)、垂体前叶肿瘤和十二指肠胰腺神经内分泌肿瘤 (DP-NET)。其他MEN1相干肿瘤包括胸腺和肺神经内分泌肿瘤（NET）、2型胃神经内分泌肿瘤（NET）、肾上腺皮质肿瘤、嗜铬细胞瘤、面部血管纤维瘤、胶原瘤、蛰伏瘤、脑膜瘤、室管膜瘤、平滑肌瘤和脂肪瘤，以及女性患者罹患乳腺癌的风险加多( 9-12 )。与MEN1相干的荒僻肿瘤，如类癌瘤、乳腺癌、甲状旁腺癌( 13 )或肾上腺皮质癌，是MEN1患者死字的原因。

图 1.与 MEN1 相干的肿瘤。

MEN1 患者的预期寿命较短，而由于肿瘤的多发性和侵袭性，平静性内分泌肿瘤患者的颐养效果不如平静性内分泌肿瘤患者。在出现症状之前检测出肿瘤并进行针对性颐养可显贵改善预后。要完了这一主张，唯有由多学科 MEN1 巨匠团队为 MEN1 患者和家属提供临床顾问，即由真的的常设责任组用心全意竭力于于这种疾病，正如 2012 年发布的最新带领说明所建议的那样。在畴昔 8 年中，已发表了多项紧迫发现，触及 MEN1 的基因会诊、平静性内分泌肿瘤的遗传学、MEN1 相干疾病、menin 的生物学功能、潜在的药物疗法、疾病发病机制、外科手术进展以及 MEN1 的临床病程和预后。因此，针对这些最新发现进行审核对于基础科学推敲东说念主员和临床大夫了解 MEN1 的分子基础以及 MEN1 患者的贬责无疑是实时和灵验的。

对于MEN1编码卵白Menin的新发现过甚功能表征

Menin 是MEN1基因的卵白质家具，由 610 个氨基酸构成（menin 异构体 2，NCBI 参考序列：NM_130799.2）。menin 有一个相配荒僻的次要异构体（menin 异构体 1，NCBI 参考序列：NM_000244.3），它来自外显子 2 下贱 15 bp 处的潜在可变剪接位点，该位点插入 5 个氨基酸残基（在 148 个氨基酸之后）。在基因和卵白质数据库中，时常将最长的转录本指定为主要异构体；因此，有时 menin 被描摹为 615 个氨基酸的卵白质。

所关联于menin过甚突变体的推敲均收受610个氨基酸异构体进行，因为荒僻的615个氨基酸异构体在职何细胞类型中均未不雅察到。67 kDa的menin泛泛抒发，其C终局含有2个审定位信号(NLS)（NLS1: 479-497和NLS2: 588-608）和1个补助NLS（aNLS: 546-572）。因此，根据使用绿色荧光卵白标志的menin、免疫荧光和亚细胞级分Western印迹分析的实验收尾，menin可在细胞核中检测到。 Menin的翻译后修饰包括Ser394、Thr397、Thr399、Ser487、Ser543和Ser583位点的磷酸化、SUMO化和棕榈酰化，这些修饰可能增强或阻难menin在细胞核中行为肿瘤阻难因子的作用或其与细胞膜的潜在联结。这些翻译后修饰的功能性孝敬尚未在MEN1相干内分泌细胞类型或临床布景下进行推敲。

在删除一个预计为非结构化（氨基酸残基 460-519）的单个里面环区域后，东说念主类 menin（卵白质数据库编号 3U84）的三维（3D）晶体结构已被得胜破译。menin 的 3D 结构类似于“转折的左手”，“拇指”和“手掌”造成一个口袋。该结构由 4 个结构域构成：一个长的 β 发卡N端结构域、一个转谷氨酰胺酶样结构域（“拇指”）、一个含有 3 个四肽基序的螺旋结构域（“手掌”），然后是一个C端结构域（“手指”）（图 2 ）。“拇指”和“手掌”造成的口袋或腔已被证据不错促进卵白质 - 卵白质相互作用。

图 2.东说念主类menin单独或与相互作用卵白共同作用的三维晶体结构。A，menin结构自满存在一个用于卵白质-卵白质相互作用的口袋/腔体（卵白质数据库；PDB ID 3U84）。menin的不同结构域以神志编码：“ N端”为浅绿色（1-101），“拇指”为绿青色（102-230），“棕榈”为橄榄绿色（231-386），“手指”为深绿色（387端）。B，menin与JUND的menin联结基序（MBM）相互作用的结构（氨基酸27-47，紫色）（PDB ID 3U86）。C，menin与MLL1的MBM相互作用的结构（氨基酸6-13，金色）（PDB ID 3U85）。 D，menin 与 LEDGF（氨基酸 347-435，红色）和 MLL1（MBM-LEGDF 联结基序 [LBM]，氨基酸 6-153，金色）相互作用区域的三元复合物 (PDB ID 3U88)。为了便于结晶，删除了以下区域（图中所示结构中不存在）：menin 中的非结构化环（氨基酸 460-519）、JUND-MBM 中的短片断（氨基酸 40-45）以及 MLL1-MBM-LBM 中的两个环区域（氨基酸 16-22 和 36-102）。结构图像由 PyMOL（Schrodinger Inc；https://pymol.org）生成。

Menin 在 MEN1 中的抑癌作用以及 MEN1 相干肿瘤的组织局限性模式已在小鼠模子中得到考证。Men1 种系纯合敲除( Men1 -/– )在胚胎 11.5 至 14.5 时会导致胚胎致死，而Men1种系杂合敲除( Men1 +/– ) 可产生可存活的小鼠，这些小鼠在年齿 > 12-15 月龄时会在胰岛（主要为胰岛素瘤）、垂体前叶（主要为催乳素瘤）和甲状旁腺（主要为增生）中造成激素高分泌肿瘤。与 Menin 在东说念主类 MEN1 肿瘤中的抑癌作用一致，对非靶向Men1拷贝的二次打击导致的杂合性缺失 (LOH) 是Men1 +/–小鼠肿瘤造成的关键。Men1 +/–小鼠的胰岛在Men1基因座杂合性缺失(LOH) 发生之前发扬出肿瘤前增生和发育不良阶段。推敲这些肿瘤前事件的分子机制，有助于解析肿瘤的发生和发展，以及组织特异性 Menin 单倍体不及和 Menin 缺失的机制。

两种条目性小鼠模子已证据menin的肿瘤阻难作用具有组织特异性。当先，肝脏中menin条目性缺失的小鼠（Men1 f/f；ALB-Cre）不会在肝脏中造成肿瘤。其次，系数这个词胰腺中menin条目性缺失的小鼠（Men1 f/f；PDX1-Cre）会造成源自内分泌胰腺β细胞（胰岛素瘤）的肿瘤，而不是源自任何外分泌胰腺细胞的肿瘤。真谛的是，分泌胰高血糖素的胰岛α细胞中menin条目性缺失的小鼠（Men1 f/f；GLU-Cre）不会造成胰高血糖素瘤，相背，它们主要造成β细胞肿瘤（胰岛素瘤）。有可能在menin丢失后，α细胞会转分化为β细胞，或者来自menin缺失的α细胞的旁分泌信号会诱骗β细胞增殖 。正如预期的那样，甲状旁腺特异性Men1基因敲除小鼠（Men1 f/f ;PTH-Cre）会出现甲状旁腺增生和高钙血症，胰岛β细胞特异性Men1基因敲除小鼠（Men1 f /f ;RIP-Cre）会患上胰岛素瘤。由于垂体催乳细胞中RIP-Cre转基因的抒发泄漏，Men1 f/f ;RIP-Cre小鼠也会患上催乳素瘤。与东说念主类MEN1类似，小鼠（ Men1 +/–或Men1 f/f ;RIP-Cre）的催乳素瘤常见于雌性。然则，催乳素瘤性别相反的原因尚不了了。尽管条目性Men1基因敲除小鼠的Men1杂合性缺失并不依赖于自觉的二次打击，但肿瘤在胚胎menin缺失后8至10个月才会造成，而肿瘤造成延长的原因尚不了了。

由于零落与已知卵白质的相似性、零落昭彰的功能基序/结构域、零落平素或无menin的内分泌细胞系、零落MEN1肿瘤或其对应平素组织（类器官或患者起原的异种移植[PDX]）的离体模子，menin的功能表征碰到了各式挑战。通过果断与MEN1相干组织无关的细胞类型中menin的相互作用伙伴，随后在升沉推敲中考证一些相干靶点，东说念主们潜入了解了menin如何阐述其肿瘤阻难活性。尽管menin的序列莫得揭示任何功能属性，但与50多种已知功能的不同卵白质的成功或辗转相互作用有助于提供关联其在各式流程和阶梯中的作用的印迹：细胞粘附、细胞周期程度、细胞分裂、细胞畅通、细胞信号传导、细胞骨架结构、DNA树立、基因组领悟性和转录调控。在menin的相互作用伙伴中，转录因子和表不雅遗传调控因子含量丰富。menin是一种多功能卵白，在转录调控中行为辅激活因子或辅阻难因子阐述着紧迫作用。

Menin在转录调控中的功能孝敬

Menin 与各式转录因子和染色质修饰卵白的相互作用已诠释在由升沉滋长因子 β (TGF-β)/骨形态发生卵白 (BMP)、核受体、Wnt/β-catenin 和 Hedgehog (Hh) 介导的细胞信号通路中具有显贵的功能性孝敬。这些信号通路刺激转录因子召募到其同源 DNA 联结位点以颐养基因抒发。Menin 与 SMAD3 或 SMAD1/SMAD5 相互作用以促进它们的转录活性，而这些相互作用中 Menin 的缺失分别阻难 TGF-β 和 BMP 信号通路，从而拮抗它们的增殖阻难作用。核受体是通过与类固醇激素等配体联结而激活的转录因子。已诠释 Menin 可行为某些核受体 (AR、ERα、LXRα、PPARα、PPARϒ、RXR 和 VDR) 介导的基因抒发的共激活因子，况且这些相互作用中 menin 的缺失预示着影响细胞滋长和功能的特定核受体信号传导受到阻难。相背，menin 与 β-catenin 过甚相干转录因子 TCF3 和 TCF4 相互作用以阻难其活性，而 menin 的缺失会促进已知可加多胰岛 β 细胞增殖的 Wnt/β-catenin 信号传导。Menin 与 PRMT5 相互作用，通过千里积 PRMT5 依赖的阻难性组卵白修饰 (H4R3me2s) 来拮抗 Hh 信号传导，从而阻难 Hh 信号通路中基因的抒发，即GAS1和GLI1。这些基因中 menin-PRMT5 介导的阻难标志的缺失将促进 Hh 信号传导，从而上调细胞增殖。

在颐养各式刺激下贱基因抒发的AP1 JUN转录因子眷属（JUNB、cJUN和JUND）中，menin仅与JUND相互作用并阻难其转录活性。JUND的menin相互作用区域位于其N终局。JUND该区域（东说念主类JUND氨基酸残基33-36）的合成突变可龙套与menin的相互作用。此类零落menin相互作用的JUND突变体具有致癌性，因为它们会促进细胞增殖，这与menin-JUND相互作用的抑癌作用相一致。

Menin 与 DAXX（一种转录阻遏物和染色质重塑复合物的构成部分）和 SUV39H1（一种组卵白甲基转折酶，可千里积阻难性组卵白修饰 H3K9me3）相互作用，从而阻难与颐养细胞增殖相干的特定基因的转录：MME、GBX2和IL6。

H3K4me3 是一种组卵白修饰，主要位于转录肇始位点隔邻的入手子区域，用于激活基因转录。在认真千里积此组卵白标志的 MLL 眷属成员中，menin 与两种组卵白甲基转折酶 MLL1 (KMT2A) 和 MLL2 (KMT2B) 相互作用。MLL1 和 MLL2 是包含 ASH2L、hDPY30、HCF-2、RBBP5 和 WDR5 的多亚基卵白复合物的一部分，它们还与 RNA-Pol-II (POLR2B) 的 140 kDa 亚基相互作用。该卵白复合物中 menin 的缺失会导致特定基因的转录阻难，这是由于转录肇始位点隔邻入手子区域基因特异性的 H3K4me3 缺失所致。

menin 的 3D 结构自满出一个中心腔，造成一个用于卵白质相互作用的联结口袋，但莫得昭彰的 DNA 联结域，这标明为了终结基因抒发，menin 并不成功与 DNA 联结，而是依赖于其与转录调控机制构成部分的相互作用 。menin与来自 JUND 或 MLL1 相互作用区域的肽的共结晶标明，它们与 menin 口袋区域的联结是互斥的（见图2）。真谛的是，JUND 和 MLL1 的 menin 联结肽在与 menin 联结至关紧迫的 5 个残基上简直疏导。此外，menin 与晶状体上皮生息滋长因子 (LEDGF) 肽（氨基酸 347-429）和 MLL1（氨基酸 6-153，含有 menin 联结和 LEDGF 联结基序）的共结晶标明，menin 与 MLL1 之间的相互作用创建了一个联结 LEDGF 的界面，LEDGF 是一种将 MLL 复合物辅导至染色质的卵白质（见图2）。对 menin 与其他相互作用伙伴进行类似的结构推敲可能有助于详情 menin 如何与单个因子一双一相互作用或同期与多个因子相互作用以终结转录调控。

脑膜卵白靶基因的特征过甚在细胞增殖中的作用

使用 Menin 抗体通过染色质免疫千里淀联结 DNA 微阵列芯片 (ChIP-chip) 或联结下一代测序 (ChIP-seq) 等本事或染色质占据率系列分析等本事对靶基因进行全基因组分析标明，menin 定位于入手子区隔邻和基因组其他区域的数百个基因中 ( 35 ， 43 ， 44 )。尚未详情这些基因中的沿路或部分是否与 menin 行为肿瘤阻难因子的作用相干。Scacheri 等东说念主在推敲中详情的一个靶基因是Hlxb9 / Mnx1，它编码认真胰岛 β 细胞分化的胚胎转录因子 ( 43 )。他们将东说念主类胰岛中 menin 占据率的 ChIP-chip 数据与 15 周龄和 25 周龄野生型 (WT) 或 menin 劣势型 ( Men1 f/f ;RIP-Cre ) 小鼠胰岛的基因抒发数据进行了比较。Hlxb9是少数几个既与 Menin 联结，又在 Menin 缺失的胰岛中抒发发生改动的基因之一。Hlxb9 在 Menin 缺失的胰岛中抒发较高。这一发现复旧了以下不雅点：MEN1 相干肿瘤的组织特异性可能与 Menin 对胰岛 β 细胞中组织特异性靶基因（举例Hlxb9 ）的调控关联。后续推敲标明，一些 β 细胞分化因子（Foxa2、Nkx2.2、MafA、MafB 和 Hlxb9）存在 Menin 依赖性调控 ( 45-48 )。

鉴于 MLL 复合体中的 menin 与染色质中 H3K4me3 的千里积关联，另一种表征 menin 靶基因的步调是通过 ChIP-chip 或 ChIP-seq 联结互补 DNA (cDNA) 微阵列分析野生型 (WT) 和 menin-null 细胞的 H3K4me3 谱，以检测相反基因抒发。这种步调在 WT 和 menin-null 小鼠胚胎干细胞中果断出长非编码 RNA Meg3 是行为肿瘤阻难因子起作用的 menin 靶基因，据报说念，在东说念主类平静性垂体腺瘤中 MEG3 抒发缺失 ( 49-51 )。对 WT 或 menin-null 小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 以及由 WT 或 menin-null 小鼠胚胎干细胞体外分化而来的胰岛样内分泌细胞进行的类似分析标明，Hox基因是 menin的靶点 ( 42，49 )。Menin 缺失会阻难Hox基因的抒发。 Hox基因编码胚胎发育和组织稳态所必需的转录因子，据报说念，它们的特别抒发存在于各式癌症类型中。

细胞周期是menin缺失后可能失调并促进肿瘤细胞增殖的昭彰流程之一。参与细胞周期进展、保管和颐养的各式卵白质包括细胞周期卵白、细胞周期卵白依赖性激酶 (CDK)、细胞周期卵白依赖性激酶阻难剂 (CDKI) 以及肿瘤阻难因子 p53 和 RB。使用 menin 缺失型 MEF 的推敲标明，与野生型 MEF 或重建 menin 抒发的 menin 缺失型 MEF 比较，menin 缺失型 MEF 从 G0/G1 期进展至 S 期的速率加速，2 个 CDKI 基因Cdkn2c (p18) 和Cdkn1b (p27) 的抒发收敛，Cdk2 活性增强。类似地，与野生型小鼠的胰岛比较，在Men1 +/–小鼠的胰岛肿瘤中以及在急性Men1缺失（Men1 f/f ；Cre-ER 喂养他莫昔芬）的增生胰岛中也不雅察到 p18 和 p27 抒发收敛，而Cdk4 抒发升高。在Men1 +/–布景下，在这些细胞周期基因（Rb1、Tp53 、Cdk2、Cdk4、Cdkn2c和Cdkn1b）敲除的小鼠模子中，进一步推敲标明，p18失活和 Cdk4 激活可能对 Menin 缺失后的胰岛肿瘤造成至关紧迫（表 1）。

表 1.用于推敲menin丢失功能相互作用的小鼠模子

旧例双淘汰赛Men1 +/–基因型表型（胰岛肿瘤发生）Men1杂合缺失Rb1 +/–与Men1 +/–类似是的TP53 +/–与Men1 +/–类似是的Cdkn2c –/–加速不Cdkn1b –/–与Men1 +/–类似是的Cdk2 –/–与Men1 +/–类似是的Cdk4 –/–无肿瘤（ Cdk4 –/–导致的胰岛和垂体发育不全）不双敲除，β 细胞中条目性 menin 缺失 ( Men1 f/f ;RIP-Cre)基因型表型（胰岛肿瘤发生和存活）Pten 基因加速肿瘤发生并缩小寿命Kmt2a 牝牡同体加速肿瘤发生并缩小寿命Kdm5a f/f减少肿瘤发生并延永生涯期Ctnnb1 f/f减少肿瘤发生并延永生涯期阻难卵白 –/–对肿瘤发生莫得影响但延永生涯期致癌KRas突变体，伴有 β 细胞条目性menin零落症 ( Men1 +/f ;RIP-Cre )基因型表型（P5重生儿胰岛）KRas (G12D)KRas（G12D）抒发增强而不是阻难β细胞增殖

a 参考文件在正文中援用。

尽管与 MEN1 相干肿瘤细胞增殖相干的各式转录因子相互作用的 menin 特定靶基因的沿路范围仍有待详情，但小鼠模子中的升沉推敲标明，Men1与Pten、Kmt2a（Mll1）、Kdm5a（Rbp2）、Ctnnb1（β-catenin）、Inhbb（激活素-B）或致癌基因Kras之间的遗传相互作用在胰岛肿瘤和 β 细胞增殖中的紧迫性（见表1）。在 β 细胞特异性 menin 缺失（Men1 f/f；RIP-Cre）的小鼠中对这些基因进行组合遗传操作标明，Pten或Kmt2a的缺失会加速胰岛肿瘤的造成并收敛存活率，Ctnnb1或组卵白去甲基化酶（Kdm5a）的缺失会收敛胰岛肿瘤的造成并延长存活率，Inhbb的缺失不会影响肿瘤的造成但会延长 10 个月后的存活率，而活化的Kras（G12D）的抒发会增强而不是阻难 β 细胞增殖。

一种尚未被探索的步调来识别肿瘤中menin丢失的失调靶基因，即对MEN1相干肿瘤细胞过甚对应平素细胞进行单细胞RNA测序分析。

Menin 行为 MLL 重排白血病中的促癌因子的不测作用过甚潜在的颐养应用

Menin 与 MLL1 相互作用的发现揭示了 Menin 行为 MLL 交融卵白的致癌补助因子的惊东说念主功能性孝敬，而 MLL 交融卵白可驱动一种侵袭性白血病 。10 % 的急性白血病患者存在 11q23 染色体上的MLL1 / KMT2A基因染色体易位， MLL1 的N端与 80 多个不同交融伴侣的C端交融。最常见的易位是 t(4，11)(q21;q23)、t(9，11)(p21;q23) 和 t(11，19)(q23;p13)，导致 MLL-AF4、MLL-AF9 和 MLL-ENL 交融卵白的抒发。 MLL 重排（MLLr）白血病是急性髓细胞白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）的一个私有亚群，影响儿童和成东说念主。

MLL1 是保管HOX眷属基因抒发所必需的，而 HOX 眷属基因认真颐养平素的造血分化。致癌 MLL 交融卵白会导致急性白血病，因为它们会上调HOX基因（包括HOXA7、HOXA9和 HOX 辅因子MEIS1）的抒发，而 MEIS1 可增强造血干细胞增殖并阻截造血分化。驱动 MLLr 白血病的 MLL 交融保留了 MLL 中与 Menin 相互作用的部分，而 Menin 与 MLL 交融卵白的相互作用对于保管 MLL 交融驱动的基因抒发设施至关紧迫 。因此，诳骗小分子阻断 MLL 在 Menin 中央腔/袋中的相互作用，教唆这可能是颐养 MLLr 白血病的紧迫颐养政策。多年来，通过结构优化的化学蓄意，已诱骗出几种 menin-MLL 相互作用的小分子阻难剂，这些阻难剂具有更高的遵循和特异性，好意思味服生物诳骗，且药物特色得到改善。这些阻难剂已在各式实验模子系统中进行了测试，在这些系统中，它们不错阻断造血干细胞增殖并促进分化——MLLr 白血病小鼠模子、患者起原的白血病细胞系以及这些细胞系和东说念主类原代白血病细胞的 PDX 模子。这些推敲的精致收尾已升沉为两种化合物正在进行的 1 期和 2 期临床考验：Kura Oncology (KO)-539，MI-3454 ( NCT04067336 ) 的结构类似物，以及 Syndax (SNDX)-5613，VTP-50469 ( NCT04065399 )的近似类似物。这些化合物还能阻断menin与WT MLL的相互作用，标明其在非MLLr白血病中具有颐养作用。在非MLLr白血病小鼠模子中，AML的发展依赖于核仁磷卵白( NPM1 )基因突变（见于30%的AML患者），VTP-50469在白血病前期AML细胞中激勉了细胞毒作用，标明其具有驻守性颐养的后劲。

Menin-MLL 相互作用阻难剂也在实体肿瘤实验模子中进行了测试，其中 Menin 已被诠释可行为促癌补助因子来阻断 Menin 和 WT MLL 之间的相互作用。较早的 Menin-MLL 阻难剂 MI-2 已被诠释不错阻难组卵白 H3.3(p.Lys27Met) 突变的儿童神经胶质瘤的肿瘤细胞滋长。另一种 Menin-MLL 阻难剂 MI-503 的抗肿瘤作用已在去势违背性前线腺癌、尤文氏赘瘤和肝细胞癌中得到证据。menin-MLL 相互作用阻难剂在 MEN1 相干肿瘤细胞中的效用可能不足轻重，因为 Menin 在 MEN1 的布景下充任肿瘤阻难因子，况且肿瘤发扬出双等位基因 Menin 的丢失或失活。然则，世界杯(中国)这些阻难剂尚未在保留野生型menin的平静性内分泌肿瘤或捎带特定menin错义突变且保留与MLL相互作用（且无MEN1 LOH）的平静性肿瘤中进行测试。此类肿瘤的实验模子将有助于详情menin-MLL相互作用阻难剂是增强如故阻难内分泌肿瘤细胞的增殖。

Menin 在非MEN1 靶组织中行为肿瘤阻难因子的作用

梗概 45% 至 50% 的BRAF突变阳性结直肠癌自满 WNT 通路的特别颐养。在最近的一项推敲中， 4% 的BRAF突变型结直肠肿瘤样本中检测到了MEN1基因密码子 R516（根据 Menin 亚型 1，为 R521）的体细胞失活热门突变。这些数据复旧 Menin 在结直肠组织中行为肿瘤阻难因子的作用，并为结直肠癌的病理加多了另一个 WNT 通路相干基因，因为也曾诠释 Menin 参与了 WNT 通路的颐养。在另一项近期推敲了平静性骨赘瘤（恶性骨肿瘤）患者的种系易理性时，在欧洲血缘的患者中不雅察到MEN1基因致病/可能致病变异的频率高于预期（0.5%）。这些发现对骨赘瘤患者的基因检测具有紧迫意旨，并教唆menin在骨骼中可能阐述抑癌作用。然则，MEN1患者中尚未发现成骨癌的报说念。

MEN1相干内分泌肿瘤发生发展中的表不雅遗传调控

DNA 缠绕在组卵白八聚体上，该八聚体由 4 个中枢组卵白（H2A、H2B、H3 和 H4）各 2 个拷贝构成，造成核小体，即染色质的基本单元。DNA 和组卵白的表不雅遗传修饰可导致染色质结构闭合或通达，从而终结转录机制的参加以及 DNA 复制和树立等其他流程。各式表不雅遗传因子造成多卵白复合体（其中可能还包含长链非编码 RNA），行为酶或补助因子，“写入”、“读取”或“擦除”DNA 和组卵白上的修饰。DNA 修饰包括甲基化、羟甲基化和进一步的氧化。组卵白的翻译后修饰被称为组卵白“标志”，包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化和其他修饰。精准调控这些表不雅遗传修饰过甚调控机制对于驻守可能导致肿瘤和其他疾病的细胞特别增殖和功能至关紧迫。由于表不雅遗传修饰不错被写入、读取和擦除，因此，诳骗大要阻断或增强酶活性或表不雅遗传调控因子关键相互作用的药物，不错将特别的表不雅遗传改动归附到平素情状，从而为颐养提供了契机。

MEN1相干肿瘤的表不雅遗传事件

据报说念，MEN1 相干肿瘤存在各式表不雅遗传学改动（图 3）。menin 与组卵白修饰卵白的相互作用，止境是与认真写入组卵白标志 H3K4me3 的卵白质复合物中的组卵白赖氨酸甲基转折酶 (KMT) MLL1/KMT2A 和 MLL2/KMT2B 的相互作用，复旧了表不雅遗传调控在 MEN1 肿瘤中阐述作用的凭据。组卵白甲基转折酶甲基化核小体杰出氨基酸链（组卵白尾）中的赖氨酸或精氨酸残基。组卵白 H3 不错在 4、9、27、36 和 79 位赖氨酸残基上发生甲基化，甲基化基团数目为 1、2 或 3 个。基因抒发的激活或千里默受特定组卵白H3赖氨酸残基的甲基化或去甲基化水平调控。H3K4me3是活跃转录基因的标志，而H3K9me3和H3K27me3与转录千里默相干。特定的赖氨酸去甲基化酶（KDM）不错排斥H3K4或H3K9的单甲基化、去甲基化或三甲基化，举例赖氨酸特异性去甲基化酶1（LSD1/KDM1A）、赖氨酸特异性去甲基化酶2（LSD2/KDM1B）和Jumonji AT-rich相互作用结构域1A（JARID1A/KDM5A/RBP2）。

图 3.多发性内分泌肿瘤1型 (MEN1) 相干肿瘤的表不雅遗传调控暗示图。左侧自满平素细胞中的表不雅遗传修饰。中间自满肿瘤中menin缺失后不雅察到或预计到的特别表不雅遗传变化。右侧自满特别表不雅遗传变化的后果。绿色和红色分别线路特定组卵白或DNA表不雅遗传修饰的性质、基因抒发的活性或阻难性标志。带有斜线的空腹玄色椭圆线路该组卵白标志的缺失。端粒替代延长 (ALT) 在肿瘤中被激活，而在平素细胞中不存在（用带有斜线的蓝色空腹椭圆线路）。未自满 miR-24 介导的表不雅遗传调控。

在β细胞特异性menin缺失的小鼠（Men1 f/f ;RIP-Cre）中，H3K4me3在MEN1相干胰岛肿瘤中的表不雅遗传调控已被探索。在2月龄Men1 f/f;RIP-Cre和对照RIP-Cre小鼠的胰岛中，已检测了基因激活标志H3K4me3过甚对应隐性标志H3K27me3的全基因组散布（75）。抗H3K4me3免疫组织化学检测自满，与对照胰岛比较，menin缺失的胰岛中H3K4me3的全体/总水平莫得显贵变化。在 menin-null 胰岛中，H3K4me3 的丢失与特定基因组内的 H3K27me3 的赢得相干，况且与对照胰岛比较，此类基因的抒发显着收敛，止境是编码胰岛素样滋长因子 2 信使 RNA 联结卵白 2（Igf2bp2）的基因。真谛的是，在 menin-null 胰岛中，改动的表不雅遗传标志（H3K4me3 的丢成仇 H3K27me3 的赢得）和 Igf2bp2 的抒发收敛不错通过同期删除 H3K4me3 去甲基化酶 Rbp2（Men1 f/f；Kdm5a f/ f；RIP-Cre）来逆转。抗 H3K4me3 免疫组织化学自满，与对照胰岛比较，menin-Rbp2-null 胰岛中 H3K4me3 的全体/总体水平莫得显着变化。 β细胞特异性menin和Rbp2谐和缺失的小鼠胰岛肿瘤造成率收敛，生涯期延长。因此，由于menin缺失而发生的特定表不雅遗传学改动是不错逆转的（通畴昔除Rbp2组卵白去甲基化酶），而将表不雅遗传学改动归附到基础平素情状也不错减少肿瘤造成。

东说念主们已推敲了 Menin 与精氨酸甲基转折酶 PRMT5 相互作用对 MEN1 相干胰岛肿瘤细胞增殖的表不雅遗传调控，PRMT5 会千里积阻难性组卵白标志 H4R3me2s。在 MEF 中，menin 与 PRMT5 共同阻难Gas1基因的抒发，而 Gas1 基因参与 Hh 信号通路的激活。GAS1 是 Sonic Hedgehog 配体与其受体 PTCH1 联结以刺激 Hh 信号传导所必需的。因此，在 menin 缺失的肿瘤中，GAS1 阻难会被吊销，从而激活 Hh 信号传导。使用 Hh 阻难剂 GDC-0449 对 8 月龄Men1 f/f ;RIP-Cre 小鼠颐养 4 周，可使胰岛 β 细胞增殖减少约 60%。但尚未推敲其对肿瘤大小和总体生涯率的影响。这项推敲标明，阻断由于menin依赖性表不雅遗传标志的丢失而导致的特别信号传导不错阻难细胞增殖。

在MEN1相干胰岛肿瘤中推敲的另一种组卵白修饰是与活性转录相干的组卵白乙酰化。组卵白尾部赖氨酸残基上的乙酰化标志由组卵白乙酰转折酶 (HAT) 千里积，并由溴结构域和特地终局 (BET) 卵白中的溴结构域读取。JQ1 是一种小分子阻难剂，可阻难溴结构域与乙酰化组卵白的相互作用。给30周龄的Men1 f/f ;RIP-Cre小鼠每周打针两次JQ1，抓续1个月，可使肿瘤中胰岛β细胞的增殖率收敛49%至55%，并显贵加多细胞凋一火。本推敲未评估其对肿瘤大小和总生涯期的影响。尽管尚未推敲 MEN1 相干肿瘤中组卵白乙酰化的具体表不雅遗传变化，但这项推敲强调了针对组卵白乙酰化标志的后劲。

一些推敲访谒了 MEN1 相干肿瘤中的 DNA 甲基化，这是一种 CpG 位点的表不雅遗传修饰，尤其是在基因入手子区域。DNA 高甲基化时常与基因千里默同期发生。此外，H3K4me3 已被证据不错保护 CpG 岛免于 DNA 甲基化，从而颐养基因转录。不错通过成功阻难树立、增殖和保管 DNA 甲基化标志领悟性的 DNA 甲基转折酶 (DNMT) 来阻断 DNA 甲基化。在部分 MEN1 肿瘤中检测到了 DNA 高甲基化。在 MEN1 患者的甲状旁腺肿瘤和无功能性胰腺神经内分泌肿瘤 (pNET) 中检测到了全体 DNA 高甲基化。此外，在 MEN1 相干的晚期 pNET 中，入手子高甲基化是一个常见事件。在 RIP-TVA 小鼠中使用体细胞基因转折系统，DNMT1 的抒发加多了 β 细胞增殖，这标明 DNMT1 不错行为阻难 DNA 高甲基化和 β 细胞增殖的靶点。

已对 MEN1 相干的 pNET 进行了端粒长度评估。端粒是保护染色体终局的特殊染色质结构。端粒替代性延长 (ALT) 是一个端粒酶孤苦的流程，在癌细胞中被激活，以防护体细胞平素增殖流程中随同的端粒缩小。ALT 与预后的相干性在不同类型的癌症中有所不同。染色质重塑基因死字结构域相干卵白 ( DAXX ) 和 X 连锁 α-地中海贫血/智力低下 ( ATRX ) 的突变与平静性 pNET 中的 ALT 激活相干。一项对于无功能性 pNET 的推敲标明，48% 的平静性 pNET 和 25% 的 MEN1 相干 pNET 为 ALT 阳性，且 ALT 与疾病复发相干。

非编码RNA (ncRNA) 介导的基因千里默是另一种在MEN1相干肿瘤中被推敲的表不雅遗传机制。ncRNA有两种类型：短ncRNA（少于30个核苷酸）和长ncRNA（大于200个核苷酸）。microRNA是在转录和转录后水平调控基因抒发的短ncRNA。在8周龄Men1 f/f ;RIP-Cre小鼠的增生胰岛和东说念主类甲状旁腺肿瘤中，miR-24（过甚未稳固样式miR-24-1）已被证据靶向menin，因为miR-24水平升高与menin水平收敛相干。这种千里默menin的机制可能也导致了在MEN1相干肿瘤中MEN1失活的第二次体细胞“打击”，而这些肿瘤在MEN1基因座上莫得发扬出LOH。

探索表不雅遗传会诊和颐养遴荐

表不雅遗传改动在肿瘤中较为领悟，因此可用作会诊标志。此外，表不雅遗传改动是可逆的，不错通过靶向颐养归附平素的表不雅遗传情状，举例通过阻断表不雅遗传调控因子的酶活性、龙套染色质修饰卵白复合物中的特定相互作用、干扰表不雅遗传标志的读取，或靶向降解特定表不雅遗传因子。

在Men1 f/f ;RIP-Cre 小鼠或东说念主类肿瘤样本中，MEN1 相干肿瘤存在表不雅遗传学改动，这标明可将表不雅遗传学改动行为此类肿瘤会诊和颐养遴荐的生物标志物。MEN1 相干肿瘤中可能发生的表不雅遗传学改动包括：一部分基因中活性组卵白标志 H3K4me3 的丢失、一部分基因中阻难性组卵白 H3K27me3 的赢得、由于Gas入手子区阻难性组卵白标志 H4R3me2s 的丢失而导致的 Hh 信号增强、组卵白乙酰化、DNA 高甲基化、ALT 和狭窄 RNA 介导的 menin 抒发千里默（图 3）。DNA、组卵白和 ALT 的表不雅遗传学改动是否同期发生在 MEN1 相干肿瘤中尚未推敲。

实考凭据标明，去甲基化酶Rbp2的缺失可逆转Men1 f/f ;RIP-Cre肿瘤中组卵白甲基化的变化，这标明诳骗表不雅遗传药物阻难MEN1相干肿瘤中的该去甲基化酶存在颐养后劲。雷同，BETi (JQ1) 可收敛Men1 f/f ;RIP-Cre肿瘤中的细胞增殖，这标明靶向组卵白乙酰化可行为MEN1相干肿瘤的潜在表不雅遗传颐养遴荐。

晚期肿瘤 DNA 的表不雅遗传变化不错通过血液和血清样本中的轮回游离 DNA (cfDNA) 来测量。由于肿瘤中的表不雅遗传变化领悟，且 cfDNA 样本获取无创，因此这种潜在的会诊检测 (cfDNA 液体活检) 正在针对各式癌症进行探索，但尚未在临床环境中应用于任何类型癌症的颐养。针对肿瘤 DNA 高甲基化的颐养遴荐包括 DNA 低甲基化药物、地西他滨和氮胞苷，它们针对 DNA 甲基化酶。这些药物已被好意思国食物药品监督贬责局批准用于颐养特定的血液系统恶性肿瘤，并可在发扬出 DNA 高甲基化的 MEN1 相干肿瘤实验模子中探索行为潜在的颐养遴荐。

端粒特异性荧光原位杂交本事已用于测定东说念主类肿瘤样本中的ALT情状，并可行为组织活检的会诊检测步调。已有针对ALT的潜在疗法被提议。miR-24介导的野生型MEN1等位基因千里默在无11q13 LOH的东说念主类甲状旁腺肿瘤中的收尾可进一步推敲，以诱骗基于RNA拮抗剂的政策，从MEN1基因的非突变拷贝归附menin的抒发，从而终结肿瘤发生。

表不雅遗传疗法的诱骗和应用仍濒临诸多问题和挑战，举例在受影响组织中的细胞特异性靶向性、反作用、耐药性以及如何对靶点完了抓续、一致和抓久的作用。尽管有多种表不雅遗传药物正在临床考验中，但要将药物研发收尾升沉为东说念主类患者，仍需克服这些挑战。

对MEN1进行基因解码所赢得的新意识

当今的生殖细胞系或体细胞MEN1基因检测包括DNA序列分析（用于筛查编码外显子和剪接点突变）和多重汇注依赖性探针扩增（用于缺失/重复 (del/dup) 分析）以筛查更大范围的变异。自觉现以来，MEN1基因检测已成为MEN1会诊和颐养的紧迫构成部分。MEN1基因筛查有助于确诊临床会诊、详情捎带者以赶早期监测肿瘤。此外，在存在临床和遗传性MEN1的眷属中，MEN1基因检测阴性的支属不错免于终生肿瘤监测的职守。

由来自外洋中心的内科大夫、外科大夫、遗传学家和其他巨匠构成的巨匠小组制定的临床本质共鸣指南概述了对 MEN1 进行基因检测的建议。现行指南建议，患者在基因检测前后必须接受遗传接头。对于哪些东说念主应该接受检测，指南指出，应向以下东说念主群提供检测：1) 临床 MEN1 的指令病例（发扬为 2 个或以上 MEN1 相干内分泌肿瘤），2) 早在 5 岁之前患有 MEN1 基因的患者（已知的MEN1突变捎带者）的无症状一级支属，3) 患有 MEN1 基因的患者有症状的一级支属，并发扬为至少一种 MEN1 相干肿瘤，以及 4) 30 岁之前患有多腺体甲状旁腺疾病或甲状旁腺腺瘤的患者，以及任何年齿患有胃泌素瘤或多发性胰岛肿瘤的患者。

测序和缺失/重复分析可在70%至90%具有MEN1典型特征的眷属中识别出杂合的MEN1种系突变。2015年对已发表的种系突变的总结发现了576个私有突变，2019年，MEN1突变通用突变数据库（UMD-MEN1数据库）说明了另外181个私有种系突变。这757个私有的MEN1种系突变遮蔽了系数这个词编码区，莫得热门。

昭彰致病的种系突变（69%）可预计 menin 的过早截短，包括无义突变（14%）、移码突变（42%）、剪接位点突变（10.5%）和多数缺失（2.5%）（图 4）。错义突变（25.5%）和一个或多个氨基酸的框内插入或缺失（indel）（5.5%）不成预计 menin 的昭彰失活，它们是良性如故致病性需要进一步推敲。在多项推敲和在眷属成员中，通过分析突变类型或其位置与 MEN1 的临床发扬，莫得发现明确的基因型-表型相干性。雷同，平静性肿瘤中的体细胞MEN1突变也莫得发现任何热门或与特定肿瘤类型的明确基因型-表型相干性。

图 4.不同类型MEN1突变的百分比散布。无义突变、移码突变、剪接突变以及占突变总和69%的多数缺失可预计menin的昭彰失活。错义突变和框内插入或缺失（indel）突变被从饼图中切出，以指令这两类突变中可能存珍贵旨不解的变异。

在出现相宜MEN1临床特征的患者中，10%至30%未发现MEN1种系突变。这些MEN1突变阴性的患者可能捎带刻下基因检测步调无法检测的区域（举例非翻译区、内含子区和调控区）的MEN1种系突变，或肿瘤可能发扬为体细胞嵌合体（合子后MEN1突变），或捎带其他基因的种系突变（举例CDKN1B ），或多个肿瘤的临床发扬是未必发生的，莫得潜在的种系突变。候选基因分析、全基因组测序（WGS）或全外显子组测序（WES）步调已被用于揭示MEN1突变阴性病例中的种系遗传劣势。

MEN1错义突变的计较机分析

MEN1基因检测的挑战之一是对错义突变和框内插入/缺失突变的解读，这些突变无法预计对卵白质结构或功能的昭彰龙套性影响。鉴于menin是一种多功能卵白，与多种卵白相互作用，错义突变和框内插入/缺失突变可能以各式方式龙套menin的功能。然则，当今尚无可靠的功能分析来详情MEN1错义突变的影响。无需进行功能推敲，即可通过计较机模拟预计器具评估氨基酸替换对卵白质结构或功能的影响：SIFT（从耐受性中筛选不耐受基因）、PolyPhen-2（多态性表型分析V-2）、MutationTaster、MutationAssessor和其他类似器具。预计设施基于多种法度，举例序列同源性、替代氨基酸之间的物理化学相似性、进化保守性或可用的三维结构。然则，这些器具仅用于预计，其对致病后果的解读应严慎使用。

东说念主们已诳骗 menin 的结构来评估错义突变的影响。一项推敲将 159 个私有的MEN1错义突变映射到 menin 的 3D 结构上，收尾标明 66% 位于可能龙套卵白质结构领悟的埋藏残基中。其余 34% 位于泄漏于溶剂的位点，可能会毁伤卵白质 - 卵白质相互作用。这项推敲并未比较致病性和良性错义突变之间的相反。另一项推敲对 345 个MEN1错义突变进行了计较机热力学分析，分析了来自卵白质数据库的各式结构的 menin 单独或与相互作用伙伴肽（MLL、JUND 或 MLL/LEDGF）或 menin-MLL 相互作用的小分子阻难剂造成的复合物。卵白质结构的热力学不领悟度以 FoldX 设施计较的氨基酸取代引起的解放能变化 (ΔΔG) 来测度。较高的 ΔΔG 值（> 4 kcal/mol）与激烈的不领悟效应相干，从而提供计较机模拟阳性预计值来辨别致病性和良性错义变异。

2015 年，好意思国医学遗传学和基因组学学会 (ACMG) 和分子病理学协会 (AMP) 在其法度和指南中推选了一种变异分类框架。该框架提议了一个 5 级变异分类系统：致病、可能致病、意旨不解、可能良性和良性。该分类基于等位基因频率、分离、重新、卵白质抒发、功能推敲和其他成分。对于MEN1错义变异的解释，TENGEN 收集 (法国神经内分泌肿瘤肿瘤遗传学收集) 提议了对 ACMG-AMP 框架的调整。这些建议可用于MEN1错义变异的分类和 MEN1 的基因会诊。

分子遗传学推敲进展过甚在MEN1基因会诊中的应用

MEN1基因检测的上风之一是大要确诊临床MEN1。然则，对于临床MEN1患者，要是其疾病发扬不齐备，仅发扬为表型拟态，或MEN1样病变，且其特征为在3个主要MEN1相干内分泌组织中仅有1个出现肿瘤，则MEN1基因检测收尾为阴性。识别出至少有一个与MEN1肖似特征的内分泌肿瘤轮廓征的易感基因，有助于推广MEN1突变阴性病例的基因会诊范围，使其大要将这些特地的基因纳入基因检测步调中（图5）。在有或无临床 MEN1 眷属史的10% 至 30% 的MEN1种系突变阴性病例中，少数病例可能荒僻地检测出 MEN1 样疾病基因的种系突变阳性（ CDKN1B或其他 CDKI 基因、CDC73、CASR、GNA11、AP2S1、GCM2和AIP）。因此，应通过基因组学步调进一步评估临床 MEN1 样病例的遗传易理性，以详情致病突变和基因。

图 5.MEN1 及 MEN1 样疾病种系基因筛查建议步调暗示图。MEN1：指患者患有 2 种或以上 MEN1 相干内分泌肿瘤。MEN1 样：指患者仅患有 3 种主要 MEN1 相干内分泌肿瘤中的一种。临床 MEN1：指患者具有 MEN1 或 MEN1 样疾病的特征。遗传性 MEN1：指种系MEN1突变阳性。WES（全外显子组测序）；WGS（全基因组测序）；+ve：基因检测阳性；-ve：基因检测阴性；+ve*：根据好意思国医学遗传学与基因组学学会 (ACS) 和分子病理学协会 (AMO) 的指南，基因检测阳性。

在临床MEN1病例中发现潜在缺失的MEN1突变的一种步调是筛查MEN1的非编码区（入手子、内含子和非翻译区），这些区域不属于刻下基因检测步调。一项推敲对MEN1的系数这个词7.2千碱基基因组区域进行了靶向二代测序，在76例患者中，有16例未检测到突变。此外，76例病例中均未在MEN1的非编码区中出现点突变或短插入/缺失突变，这标明此类突变可能相配荒僻。

仅有一项推敲对既往MEN1基因检测呈突变阴性的患者的体质和肿瘤 DNA 样本进行了 WGS 。在分析的 6 名患者中，令东说念主惊诧的是，在 3 名患者中发现了致病性MEN1种系杂合突变（2 个剪接位点变异 c.1186-2A > G 和 p.Arg223Arg (CGG > CGC)，以及一个错义变异 p.Pro12Leu），而之前的旧例基因检测却遗漏了这些变异。又名患者在CASR (p.Ile555Val) 中出现致病性种系杂合错义突变，又名患者在 1q 染色体上出现种系杂合缺失，包括CDC73。在团结推敲中，对另外 6 名突变阴性患者的肿瘤 DNA 样本进行的 WGS 未检测到任何可能行为肿瘤阻难因子的复发基因体细胞变异。因此，本次全基因组测序（WGS）分析的收尾教唆，先前旧例基因检测可能遗漏种系突变，这可能是由于测序或变异分类步调较旧所致。因此，对于出现临床MEN1症状且MEN1突变可能性较高的个体（甲状旁腺、垂体和内分泌性胰腺肿瘤；或甲状旁腺和内分泌性胰腺肿瘤），重复进行MEN1基因检测可能有所匡助。

不错筹商通过合营和其他新步调来识别10% 至 30% 临床 MEN1 突变阴性病例中的MEN1或其他基因的突变。血液转录组测序已被用于识别荒僻疾病基因，即对从全血样本平分离的 RNA 进行 RNA 测序分析，以检测由于 DNA 变异导致的转录改动的任何凭据。要是转录本在血细胞中抒发（举例MEN1），则不错检测到编码外显子内的错义、同义和功能丧失突变对剪接和抒发水平的影响。功能丧失突变可通过无义介导的衰变导致转录水平收敛。此外，血液转录组分析不错识别由于调控区变异导致的一个等位基因抒发收敛。当与 WGS 联结时，不错识别出主张基因中导致转录改动的相应 DNA 变异。这种步调的局限性之一是，由于致病基因在血细胞中零落抒发，因此无法识别致病基因。此外，要是致病变异不影响基因的剪接或抒发，这种步调可能无法得胜识别疾病易感基因。

瘤，并可完了安全的组织消融。2015 年，Armellini 等东说念主诠释了 EUS-RFA 对拒却手术的 pNET 患者进行颐养的安全性和可行性。消融后，患者无症状，1 个月后的 CT 自满辐射学消融齐备，这标明 RFA 在某些病例中可行为手术的潜在替代决策。 Lakhtakia 和 Seo 以及 Waung 等报说念，对 4 例胰岛素瘤患者进行了 EUS-RFA 颐养，经过 12 个月和 10 个月的随访，系数患者均赢得临床齐备缓解（2 例患者赢得形态学齐备缓解）。

也有推敲探讨了胰腺病变射频消融 (RFA) 对全身免疫颐养响应的影响。初步评估 RFA 全身响应的收尾已诠释世界杯(中国)，对于局部晚期胰腺肿瘤（并非专指 pNET），加多免疫颐养作用的凭据是可行的。一个推敲小组不雅察到，免疫阻难的适合性响应深广激活。这种情况是否也适用于 pNET 尚需进一步推敲。